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科达旋转蒸发仪在鹿角脱盘多肽分离提取实验中的应用

  • 文:郑州科达机械仪器设备有限公司
  • 日期:2016-11-08
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   科达旋转蒸发仪在鹿角脱盘多肽分离提取实验中的应用:

   1 材料

   1.1 药材及细胞株梅花鹿鹿角脱盘购于长春市双阳鹿场,粉碎后4℃保存。

   1.3 仪器:真空旋转蒸发仪(RE-52A型) ,郑州科达机械仪器设备有限公司;酶标仪( DG5033A型) ,SHZ-III循环水式真空泵;PCR仪( MG25+型) ,杭州朗基科学仪器有限公司,荧光定量PCR仪( ABI7500Fast型) ,美国ABI公司。

科达旋转蒸发仪在鹿角脱盘多肽分离提取实验中的应用

郑州科达旋转蒸发仪图片

   2 旋转分离多肽的实验方法。

   2.1 鹿角脱盘多肽的分离提取取。用奥豪斯电子天平CP2102称取500g鹿角脱盘粉,加入2.5L预冷的pH3.5的醋酸-醋酸钠缓冲液,用胶体磨反复匀浆。匀浆液离心(4℃,5000r/min,20min) 后取上清,加入预冷的95%乙醇使其终浓度达到55%,4℃放置4h后离心( 4 ℃,5000r/min,20min) ,上清液置于上海亚荣RE-52A旋转蒸发仪中设置水浴锅温度为40℃真空旋转蒸发,回收乙醇至浓缩液体积为300ml左右,冷冻干燥,即为鹿角脱盘多肽粗提物。

   2.2 多肽粗提物的脱盐( 凝胶过滤层析法) 。采用SephedaxG-25葡聚糖凝胶填料进行柱层析。用电子天平称取鹿角脱盘多肽冻干品0.5g,用5ml去离子水溶解并过滤;样品浓度为0.1g/ml,上样量为1ml,流速为0.5ml/min,检测波长为280nm。将样品用胶头滴管沿柱壁缓慢加入柱内,用去离子水洗脱,至出峰时起用自动馏分收集器收集并冻干。

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